可重復(fù)性細(xì)胞培養(yǎng)皿是用于細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)室器皿,利用它作細(xì)胞實(shí)驗(yàn)使得在顯微鏡下觀察更加方便田蝠、快捷掠佛。其材質(zhì)基本上分為兩類(lèi),主要為玻璃和塑料的权塑。玻璃為底片的細(xì)胞培養(yǎng)皿常見(jiàn)的是鐵皿蔽碘,塑料制成的常見(jiàn)的是一次性皿。鐵皿和塑料皿各有優(yōu)點(diǎn)托茅,鐵皿清洗操作更為完整武慨,玻璃底片清洗更加干凈,而塑料皿清洗操作相對(duì)簡(jiǎn)潔层焚,使用方便行掰、快捷。
(組合圖)
玻璃蓋 上層鐵環(huán) 橡膠圈 玻片 下層鐵環(huán)
(各部件圖)
鐵皿分為五部分(如上圖所示)岸腔,安裝順序是按照上圖所示坪江,由右到左依次往上疊加合好,最后擰緊脑溢。
準(zhǔn)備流程:
① 第一天:將玻片放在小燒杯里僵朗,放在超聲儀器內(nèi)超聲30min。超聲過(guò)后屑彻,用自來(lái)水清洗玻片衣迷,之后放入烘箱,等玻片烘干后酱酬,泡酸一晝夜壶谒。
② 第二天:將泡過(guò)酸的玻片先用自來(lái)水清洗20遍,再用二重水清洗15遍膳沽。將用過(guò)的培養(yǎng)皿拆開(kāi)用繩子穿起來(lái)汗菜,玻璃片上的字用酒精棉擦拭干凈。將培養(yǎng)皿放入超聲儀器內(nèi)超聲30min挑社,之后陨界,用自來(lái)水及二重水分別清洗。將玻片及鐵片痛阻、玻璃片裝在一起菌瘪,盛上水放在干凈報(bào)紙上驗(yàn)漏(需一整夜)。
③ 第三天:將鐵皿烘干(注意鐵皿是否漏水音拢,報(bào)紙濕潤(rùn)即棄用)莱芥,烘干后(注意鐵皿是否變松,可再擰緊)用報(bào)紙包好(鐵皿玻片朝內(nèi)丈蛇,接觸報(bào)紙端放玻璃片)滅菌娩证,再烘干阁巨。
傳細(xì)胞流程:
① 將清洗液,消化液隐睹,培養(yǎng)液岸寿,鐵皿(紫外照過(guò)),EP管放入超凈臺(tái)。
② 取出培養(yǎng)瓶放在顯微鏡下觀察(細(xì)胞長(zhǎng)滿(mǎn)且無(wú)污染的情況下)鹿脯,用PBS清洗兩遍践斟,加1ml(大瓶加2ml,小瓶加1ml)的消化液抵师。細(xì)胞消化完全后顶赎,將消化液吸出,加2ml的培養(yǎng)液盯桦,使細(xì)胞與培養(yǎng)液混合均勻。
③ 將培養(yǎng)瓶中的液體移0.1ml加入EP管渤刃,再在EP管中加入0.4ml的培養(yǎng)液拥峦,混合均勻,之后將EP管中液體移入鐵皿卖子,盡量使細(xì)胞在鐵皿中覆蓋均勻(可在高倍顯微鏡下觀察略号,不均勻時(shí),用中槍吹勻)洋闽。
④ 用封口膜封好鐵皿玄柠。在培養(yǎng)瓶中再加入適當(dāng)培養(yǎng)液,混合均勻诫舅。